QPCR zondo metodas

Mar 01, 2022 Palik žinutę

Koronavirusas yra tam tikras virusas, turintis apvalkalą ir linijinį vienos grandinės teigiamą RNR genomą. Jo skersmuo yra apie 80-120 nm. Šiuo metu juo užsikrečia tik stuburiniai gyvūnai, tokie kaip žmonės, pelės, kiaulės, katės, šunys ir naminiai paukščiai. Nustatyta, kad naujasis koronavirusas COVID{1}} gali sukelti virusinę pneumoniją, nedidelį karščiavimą, sausą kosulį, sunkius kvėpavimo sutrikimus ir net šoką.

RXC sukurtas naujojo koronaviruso (COVID-19) nukleorūgščių aptikimo rinkinys (QPCR zondo metodas) sukūrė dvigubą taikinį, pagrįstą naujojo koronaviruso ORF 1ab (RDRP genu) ir specifine konservuota seka, koduojančia N geną. nukleokapsidės baltymas. Naudojant vienos pakopos atvirkštinės transkripcijos polimerazės grandininę reakciją (RT-PGR) kartu su TaqMan hidrolizės zondo technologija, mėginio RNR buvo aptikta pasikeitus fluorescencijos signalui fluorescencijos kiekybiniame PGR prietaise.

PGR aptikimo sistema apima pradmenis ir vidinių standartinių genų zondus. Mėginių paėmimo ir ekstrahavimo procesas stebimas nustatant, ar vidinis standartas yra normalus, kad būtų išvengta klaidingai neigiamų rezultatų.

Naujojo koronaviruso (COVID-19) nukleorūgščių aptikimo rinkinyje (skaitmeninis PGR metodas), kurį sukūrė Rui Xun biology, buvo panaudota skaitmeninė PGR lašelių technologija kartu su Taqman fluorescencinio zondo technologija, kad būtų galima kokybiškai aptikti naująjį koronavirusą.

Mėginiai buvo atsitiktinai priskirti dešimčiai tūkstančių alyvos lašelių, pagamintų naudojant skaitmeninį PGR lustą. Lašelis buvo sureaguotas su PGR. Pasibaigus PGR reakcijai, buvo nuskaityti kiekvieno lašelio fluorescenciniai signalai, o statistikai ir analizei panaudotas Puasono pasiskirstymo principas, kad būtų tiksliai aptiktos naujojo koronaviruso (COVID-19) specifinės genų kopijos.

Tarp jų COVID-19 ORF 1ab aptikimo zondas buvo pažymėtas FAM fluorescencija, N geno aptikimo zondas buvo pažymėtas šešioliktaine fluorescencija, o vidinis standartas buvo pažymėtas Cy5 fluorescencija.


Siųsti užklausą

Namuose

Telefono

El. paštas

Tyrimo