Chemiliuminescencinis imunologinis tyrimas, CLIA yra labai jautrus imunologinio tyrimo metodas.
1. Principas
Chemiliuminescencinis imunologinis tyrimas sujungia imuninio atsako specifiškumą ir didelį chemiliuminescencijos jautrumą. Jo pagrindinis principas yra sujungti specifinį imuninį atsaką tarp antigeno ir antikūno su chemiliuminescencine reakcija. Tiksliau, antigenas tiriamame mėginyje susijungia su specifiniu antikūnu ir sudaro imuninį kompleksą. Tada per daugybę cheminių reakcijų imuninis kompleksas sukuria chemiliuminescencinį signalą. Liuminescencijos intensyvumas yra proporcingas tiriamo antigeno koncentracijai, o tiriamo antigeno kiekis gali būti kiekybiškai išanalizuotas nustatant liuminescencijos intensyvumą.
2. Pagrindiniai komponentai
Antikūnai: įskaitant fiksuojančius antikūnus ir aptikimo antikūnus. Fiksuojantis antikūnas paprastai fiksuojamas ant kietosios fazės nešiklio, kad būtų užfiksuotas tiriamas antigenas. Aptikimo antikūnas derinamas su chemiliuminescenciniu žymeniu, kad būtų galima aptikti antigeną imuniniame komplekse.
Kietosios fazės nešiklis: pvz., mikroplokštelės, magnetiniai rutuliukai ir kt., naudojami fiksuojančiam antikūnui fiksuoti, siekiant palengvinti imuninę reakciją ir atskyrimą bei plovimą.
Chemiliuminescencinis žymuo: paprastai medžiaga, kuri cheminės reakcijos metu gali sukelti liuminescencinį signalą, pvz., luminolis, akridinio esteris ir kt. Žymeklis susijungia su aptikimo antikūnu, kad po imuninės reakcijos susidarytų chemiliuminescencinis signalas.
Aptikimo sistema: įskaitant įrangą, tokią kaip liuminescenciniai detektoriai, kurie naudojami chemiliuminescencinių signalų intensyvumui aptikti ir konvertuoti juos į nuskaitomas vertes.
3. Savybės
Didelis jautrumas: gali aptikti itin mažas bandomosios medžiagos koncentracijas, kurios paprastai yra keliomis eilėmis jautresnės nei tradiciniai imunologiniai metodai.
Platus linijinis diapazonas: bandomosios medžiagos kiekį galima tiksliai išmatuoti plačiame koncentracijos diapazone be daugybinių praskiedimų.
Stiprus specifiškumas: remiantis specifiniu antigeno ir antikūno surišimu, jis yra labai selektyvus konkrečioms tiriamosioms medžiagoms.
Greitas: aptikimo procesas yra gana greitas, o rezultatus paprastai galima gauti per trumpesnį laiką.
Aukštas automatizavimo laipsnis: tinka didelio masto mėginiams aptikti ir gali būti naudojamas kartu su automatizuotais instrumentais, siekiant pagerinti aptikimo efektyvumą.
4. Taikymo sritys
Klinikinė diagnozė: naudojama aptikti įvairius biologinius žymenis, tokius kaip naviko žymenys, hormonai, infekcinių ligų žymenys ir tt, kad būtų svarbus ligos diagnozavimo, gydymo stebėjimo ir prognozės įvertinimo pagrindas.
Vaistų kūrimas: naudojamas vaistų koncentracijos stebėjimui, veiksmingumo vertinimui ir vaistų metabolizmo tyrimams.
Maisto saugos tyrimai: kenksmingų medžiagų, pesticidų likučių, veterinarinių vaistų likučių ir kt. nustatymas maiste.
Aplinkos monitoringas: Teršalų ir toksinių medžiagų nustatymas aplinkoje.